Microscopia avanzata

Tipologia di strumentazione: 
Imaging - Microscopia
Neuroscience Institute Cavalieri Ottolenghi, Regione Gonzole 10, Orbassano (To) mappa
Strumentazioni e specifiche tecniche

Microscopio Confocale Leica TCS SP5

  • Microscopio: Leica DM6000CS
  • High-efficiency SP detection AOBS (Acousto-Optical Beam Splitter)
  • Laser: VIS: Argon, 65 mW, 488 nm - HeNe, 1mW; 543 nm - HeNe, 10 mW, 633 nm - UV: Diode, 50 mW, 405 nm
  • 3 fotomoltiplicatori standard e 1 detector ad alta sensibilità (Hybrid GaAsP detector)
  • Obiettivi: 20x/0.50 (dry), 20x / 0.75 (oil), 40x/1.25 (oil), 63x/1.40 (oil)
  • Filtri: RT 30/70; Substrate; TD 488/543/633; DD 458/514; RSP 500; DD 488/543
  • Software Leica LAS AF 2.6.0.7266

Microscopio Confocale Nikon C1

  • Microscopio digitale D-Eclipse C1si
  • Spectral detection unit
  • Laser: Laser Argon multilinea 488nm, He Ne 543nm, He Ne 640nm, Violet diode 408nm
  • Obiettivi: 10x/0.30 (dry), 20x/0.50 (dry), 40x/1.0 (oil), 60x/1.4 (oil)

Strumenti/software per analisi morfometriche e conte stereologiche
Postazione 1

  • Microscopio Nikon Eclipse E600
  • MBF High Resolution Color Camera
  • Obiettivi: 2X-4X-10X-20X-40X-100X
  • Filtri: DAPI, Green (Cy2, Alexa488), Red (Cy3)
  • Imaging Software: Neurolucida and Neurolucida Explorer, Stereoinvestigator
  • Dell High Performance Imaging Workstation

Postazione 2

  • Microscope Nikon Eclipse 80i
  • Color digital camera 3/4" CCD chip, 1.92 MP, 1600H x 1200V pixel
  • Microfire Camera 2-Megapixel Color Imaging (1600x1200)
  • Obiettivi: 4X-10X-20X-40X-60X-100Xoil
  • Filtri: DAPI, Green (Cy2, Alexa488), Red (Cy3), Dark Red
  • Imaging Software: Neurolucida and Neurolucida Explorer, Neurolucida360

Postazione 3

  • Neurolucida Explorer software (No connessione/controllo dello stage motorizzato o della fotocamera)
  • Software per analizzare dati precedentemente acquisiti (Mapping, Neuron Tracing, 3D Serial Section Reconstruction, Morphometry and Image Analysis)
  • Imaris software, piattaforma dedicata alla ricostruzione, manipolazione e analisi volumetrica 3D di dataset precedentemente acquisiti

Microscopio 2 fotoni Nikon A1RMP

  • Nikon High-speed multiphoton confocal microscope A1RMP
  • Stage motorizzato (Scientifica) con adattatori per in vivo, ex-vivo e in vitro imaging
  • Sistema di scansione: galvano scanner e resonant scanner per acquisizione ad alta velocità
  • Obiettivi: CFI60 Planfluor 10x A.N.0,3 d.l. 16 mm; CFI75 LWD 16xW NIR A.N.0,80 d.l. 3,0 mm; CFI75 LWD Apo 25xW A.N. 1.1 d.l. 2,0 mm; CFI60 Apo 40xW NIR A.N.0,80 d.l. 3,5 mm
  • Detector 4 Ch GaAsP NDD detector ad alta sensibilità

Microscopio Scannerizzatore Axioscan

  • Illuminatore Colibri 7, R[G/Y]CBV-UV
  • Camera Sets Hitachi HV-F203 and Orca Flash 4.0 V3
  • Obiettivi: “Fluar” 5x/0.25 M27, “Plan-Apochromat” 10x/0.45 M27, “Plan-Apochromat” 20x/0.8 M27, “Plan-Apochromat” 40x/0.95 M27
  • Filtri: 56/90/91/92 HE LED, filter set 108 HE LED, 38 HE eGFP senza shift, 43 HE Cy3 senza shift, 96 HE
  • 25 Vassoi x4 vetrini 26x76mm; 5 Vassoi x2 vetrini 52x76mm; 1 Vassoio x1 vetrino 102x76mm
  • Computer: Processor Intel Xeon Gold 6134 (hp Z6) Workstation Premium Zeiss 60A
  • Workstation: High End ZEISS 55A R2; Zen 2.6 desk Hardware; n. 4 Memories 32GB (2x16) DDR4-2133 (Z840); Scheda video NVIDIA Quadro M6000 24GB D

Workstation

  • High End ZEISS 55A R2; Zen 2.6 desk Hardware; n. 4 Memories 32GB (2x16) DDR4-2133 (Z840); Scheda video NVIDIA Quadro M6000 24GB D

Microscopio light sheet

  • Andor Zyla 5.5 sCMOS Camera
  • Infinity Corrected Optics Setup
  • Obiettivi: 4X and 12X (organic solvent dipping objective lens)
  • Laser: 488-85, 561-100, 639-70
  • Workstation per la gestione e l'analisi delle immagini 3D, condotta con software IMARIS

Attrezzatura acquisita anche con il contributo dell’Unione Europea, Compagnia di San Paolo, Fondazione CRT.

Applicazioni e servizi

Applicazioni

  • Imaging confocale a scansione (Leica TCS SP5 e NIKON C1)
  • Microscopia confocale multifotone, per imaging profondo del campione e acquisizioni in vivo (Nikon A1RMP)
  • Acquisizioni sequenziali rapide di fluorofori con bleed-through o cross-talk minimi
  • Possibilità di eseguire analisi morfometriche e conte stereologiche, anche in maniera automatizzata (Neurolucida, StereoInvestigator, Neurolucida360, Imaris)

Servizi

  • Consulenza su disegno sperimentale ed elaborazione dei dati e formazione nuovi utenti
  • Assistenza tecnica
  • Acquisizione immagini multicolore e rendering 3D sul microscopio confocale
  • Consulenza su tecniche avanzate di microscopia ottica e confocale
Accesso e tariffario

L’utilizzo della strumentazione è subordinato a una prenotazione da effettuarsi online dopo essersi accreditati come utenti interni o esterni al primo accesso. La piattaforma è prenotabile attraverso il software di gestione BookMyLab, recentemente acquistato dal Dipartimento di Neuroscienze.

Ultimo aggiornamento: 23/10/2020